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產(chǎn)品概述
QuantiCyto® Human Amphiregulin ELISA kit
Human
31.25 pg/ml
62.5-4000 pg/ml
雙抗體夾心法
比色法
血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、腦脊液、胸腔積液、組織勻漿液等
100 μl/well
3.5h
用于體外定量檢測(cè)血清、血漿或其他適用樣品中天然及重組Human Amphiregulin濃度
本試劑盒特異性識(shí)別天然和重組人Amphiregulin
與以下細(xì)胞因子等無明顯交叉反應(yīng)：Human EGF, HB-EGF, EGFR, TGF-α; Mouse Amphiregulin
欣博盛QuantiCyto?ELISA試劑盒采用雙抗體夾心法：抗人Amphiregulin單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品中的人Amphiregulin會(huì)與單抗結(jié)合，游離的成分被洗去。加入生物素化的抗人Amphiregulin抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素，生物素與親和素特異性結(jié)合；抗人Amphiregulin抗體與結(jié)合在單抗上的人Amphiregulin結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物，若反應(yīng)孔中有人Amphiregulin，辣根過氧化物酶會(huì)使無色的顯色劑現(xiàn)藍(lán)色，加終止液變黃。在450nm處測(cè)OD值，人Amphiregulin濃度與OD450值之間呈正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中人Amphiregulin的濃度。
本產(chǎn)品僅供科研使用、不用于臨床診斷
產(chǎn)品性能
組分
| 名稱 | 48T | 96T |
|---|---|---|
| 抗體預(yù)包被酶標(biāo)板 | 8×6 | 8×12 |
| 凍干標(biāo)準(zhǔn)品 | 以說明書為準(zhǔn) | 以說明書為準(zhǔn) |
| 標(biāo)準(zhǔn)品&標(biāo)本通用稀釋液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
| 濃縮生物素化抗體 | 1 支（規(guī)格見標(biāo)簽） | 1 支（規(guī)格見標(biāo)簽） |
| 生物素化抗體稀釋液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 濃縮酶結(jié)合物 | 1 支（規(guī)格見標(biāo)簽） | 1 支（規(guī)格見標(biāo)簽） |
| 酶結(jié)合物稀釋液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 濃縮洗滌液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
| 顯色底物（TMB） | 6 ml×1 瓶 | |
| 反應(yīng)終止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 封板膠紙 | 3張 | 6張 |
| 產(chǎn)品說明書 | 1份 | 1份 |
運(yùn)輸溫度
冰袋存放說明/保質(zhì)期
| 未開封完整試劑盒 | 4℃，請(qǐng)?jiān)诒Ｙ|(zhì)期內(nèi)使用 | |
|---|---|---|
| 已開封試劑盒 | 抗體包被板條 | 未用完的板條放回帶拉鏈鋁箔袋封口 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品 | 負(fù)20℃可儲(chǔ)存 6 個(gè)月左右，稀釋后即用即棄 | |
| 濃縮生物素化抗體 | 4℃可儲(chǔ)存 1 個(gè)月左右，稀釋后即用即棄 | |
| 濃縮酶結(jié)合物（避光） | ||
| 標(biāo)準(zhǔn)品&標(biāo)本通用稀釋液 | 4℃可儲(chǔ)存 1 個(gè)月左右 | |
| 生物素化抗體稀釋液 | ||
| 酶結(jié)合物稀釋液 | ||
| 顯色底物（避光） | ||
| 反應(yīng)終止液 | ||
| 濃縮洗滌液20× |
凍干標(biāo)準(zhǔn)品推薦于-20℃保存；若條件不足，也可保存于4℃。
已開封試劑盒效期特指試劑開蓋后效期，如果僅拿出標(biāo)準(zhǔn)品置于-20℃，其他組分未啟用，效期同未開封完整試劑盒。
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實(shí)驗(yàn)所需自備器材
1. 酶標(biāo)儀(450 nm波長(zhǎng)濾光片)。 2. 進(jìn)口品牌高精度加液器及一次性吸頭：0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒溫箱, 雙蒸水或去離子水，坐標(biāo)紙等。相關(guān)數(shù)據(jù)
標(biāo)準(zhǔn)曲線
| Dose（pg/ml） | Raw Data | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0.068 | 0.070 | 0.069 | |
| 62.5 |
0.103 |
0.109 | 0.106 | 0.037 |
| 125 | 0.123 | 0.129 | 0.126 | 0.057 |
| 250 | 0.232 | 0.238 | 0.235 | 0.166 |
| 500 |
0.451 |
0.459 | 0.455 | 0.386 |
| 1000 | 0.825 |
0.837 |
0.831 | 0.762 |
| 2000 | 1.436 | 1.442 | 1.439 | 1.370 |
| 4000 | 2.398 | 2.406 | 2.402 | 2.333 |
注意：本圖僅供參考，應(yīng)以同次試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品所繪標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算標(biāo)本中人Amphiregulin的含量。
重復(fù)性
板內(nèi)，板間變異系數(shù)均<10%。
| 板內(nèi)重復(fù)性 | 板間重復(fù)性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 樣本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 重復(fù)次數(shù) | 24 | 24 | 24 | 16 | 16 | 16 |
| 平均值（pg/ml） | 2658.9 | 965.4 | 236.1 | 2036.3 | 898.6 | 203.9 |
| 標(biāo)準(zhǔn)差 | 218.03 | 70.47 | 18.42 | 156.80 | 63.80 | 15.09 |
| 變異系數(shù)（%） | 8.2 | 7.3 | 7.8 | 7.7 | 7.1 | 7.4 |
科研工具箱
別稱
AR, AREGB, CRDGF, SDGF
基因ID
Gene ID:374
功能
雙調(diào)蛋白(AR 或 AREG)是表皮生長(zhǎng)因子家族中的一員，該家族成員還包括表皮生長(zhǎng)因子(EGF)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)、肝素結(jié)合表皮生長(zhǎng)因子樣生長(zhǎng)因子(HB-EGF)、表皮調(diào)節(jié)素(EREG)和神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白(NRGs)等。所有 EGF 家族成員均作為 I 型跨膜前體合成，并在其細(xì)胞外區(qū)域包含一個(gè)或多個(gè) EGF 樣結(jié)構(gòu)域。人雙調(diào)蛋白是一種約50kDa 的跨膜糖蛋白，包含一個(gè) 80 個(gè)氨基酸(aa)的 N 端前肽、一個(gè)肝素結(jié)合域、一個(gè) EGF 樣結(jié)構(gòu)域、一個(gè) 23 個(gè) aa 的跨膜段和一個(gè) 31個(gè) aa 的胞內(nèi)域。成熟的人雙調(diào)蛋白與小鼠和大鼠雙調(diào)蛋白的氨基酸序列一致性分別為 78%和 76%。雙調(diào)蛋白前體的胞外域在蛋白酶的作用下被水解切割，釋放出可溶的雙調(diào)蛋白，這一過程由腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化酶(ADAM17/TACE)調(diào)節(jié)。AREG 在多種正常組織和器官中表達(dá)，包括胎盤、卵巢、睪丸、子宮、乳腺、胰腺、心臟、骨髓、血液、腎臟、肺、脾臟和小腸等，在初乳和健康人血清中也可檢測(cè)到。 AREG 參與一系列生理過程，包括女性生殖系統(tǒng)發(fā)育、精子發(fā)生、胚胎著床、神經(jīng)元發(fā)育、骨組織發(fā)育和骨質(zhì)形成等。AREG 還涉及一系列腫瘤發(fā)生和發(fā)展過程，在腫瘤細(xì)胞的增殖、凋亡、遷移、侵襲等方面有著重要的調(diào)控作用。此外，AREG 參與腫瘤對(duì)放療和對(duì)多種化療藥物的抵抗，在放療抵抗的胰腺癌細(xì)胞中，AREG 表達(dá)明顯升高；AREG 與腫瘤細(xì)胞對(duì)順鉑的抵抗有關(guān)，順鉑耐藥的乳腺癌 MCF-7 細(xì)胞中 AREG 表達(dá)選擇性上調(diào)。AREG 還與腫瘤細(xì)胞對(duì)西妥昔單抗或帕尼單抗的抵抗有關(guān)。AREG 可以作為腫瘤早期診斷、靶向藥物療效預(yù)測(cè)及患者預(yù)后評(píng)價(jià)的生物學(xué)標(biāo)志物，也可能成為腫瘤治療中的潛在靶點(diǎn)。
研究領(lǐng)域
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo);癌癥生物學(xué)
