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產(chǎn)品概述
QuantiCyto® Human Dickkopf-1(Dkk-1) ELISA kit
Human
31.3pg/ml
62.5-4000pg/ml
雙抗體夾心法
比色法
血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、腦脊液、胸腔積液、組織勻漿液等
100 μl/well
3.5h
用于體外定量檢測(cè)血清、血漿或其他適用樣品中天然及部分重組Human Dkk-1濃度
本試劑盒特異性識(shí)別天然和重組Human Dkk-1
與天然和重組 小鼠、大鼠Dkk-1有交叉反應(yīng),與以下細(xì)胞因子等無明顯交叉反應(yīng): Human IL-2 IL-4 IL-5 IL-6 IL-8 IL-10 IL-12 Dkk-4 Kremen-1 Kremen-2 Mouse Dkk-4 Kremen-1 Kremen-2 LRP-6 Rat Dkk-4 Kremen-1 Kremen-2 LRP-6
欣博盛 QuantiCyto? ELISA試劑盒采用雙抗體夾心法：抗人Human Dkk-1單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品中的人Human Dkk-1會(huì)與單抗結(jié)合，游離的成分被洗去。加入生物素化的抗人Human Dkk-1抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素，生物素與親和素特異性結(jié)合；抗人Human Dkk-1抗體與結(jié)合在單抗上的人Human Dkk-1結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物，若反應(yīng)孔中有人Human Dkk-1，辣根過氧化物酶會(huì)使無色的顯色劑現(xiàn)藍(lán)色，加終止液變黃。在450 nm處測(cè)OD值，人Human Dkk-1濃度與OD450值之間呈正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出人標(biāo)本中Human Dkk-1的濃度。
本產(chǎn)品僅供科研使用、不用于臨床診斷
產(chǎn)品性能
組分
| 名稱 | 48T | 96T |
|---|---|---|
| 抗體預(yù)包被酶標(biāo)板 | 8×6 | 8×12 |
| 凍干標(biāo)準(zhǔn)品 | 4 ng/支×2 支 | 4 ng/支×3 支 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品&標(biāo)本通用稀釋液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
| 濃縮生物素化抗體 | 1 支（規(guī)格見標(biāo)簽） | 1 支（規(guī)格見標(biāo)簽） |
| 生物素化抗體稀釋液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 濃縮酶結(jié)合物 | 1 支（規(guī)格見標(biāo)簽） | 1 支（規(guī)格見標(biāo)簽） |
| 酶結(jié)合物稀釋液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 濃縮洗滌液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
| 顯色底物（TMB） | 6 ml×1 瓶 | |
| 反應(yīng)終止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 封板膠紙 | 3張 | 6張 |
| 產(chǎn)品說明書 | 1份 | 1份 |
運(yùn)輸溫度
冰袋存放說明/保質(zhì)期
| 未開封完整試劑盒 | 4℃，請(qǐng)?jiān)诒Ｙ|(zhì)期內(nèi)使用 | |
|---|---|---|
| 已開封試劑盒 | 抗體包被板條 | 未用完的板條放回帶拉鏈鋁箔袋封口 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品 | 負(fù)20℃可儲(chǔ)存 6 個(gè)月左右，稀釋后即用即棄 | |
| 濃縮生物素化抗體 | 4℃可儲(chǔ)存 1 個(gè)月左右，稀釋后即用即棄 | |
| 濃縮酶結(jié)合物（避光） | ||
| 標(biāo)準(zhǔn)品&標(biāo)本通用稀釋液 | 4℃可儲(chǔ)存 1 個(gè)月左右 | |
| 生物素化抗體稀釋液 | ||
| 酶結(jié)合物稀釋液 | ||
| 顯色底物（避光） | ||
| 反應(yīng)終止液 | ||
| 濃縮洗滌液20× |
凍干標(biāo)準(zhǔn)品推薦于-20℃保存；若條件不足，也可保存于4℃。
已開封試劑盒效期特指試劑開蓋后效期，如果僅拿出標(biāo)準(zhǔn)品置于-20℃，其他組分未啟用，效期同未開封完整試劑盒。
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實(shí)驗(yàn)所需自備器材
1. 酶標(biāo)儀(450 nm波長(zhǎng)濾光片)。 2. 進(jìn)口品牌高精度加液器及一次性吸頭：0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒溫箱, 雙蒸水或去離子水，坐標(biāo)紙等。相關(guān)數(shù)據(jù)
標(biāo)準(zhǔn)曲線
| Dose（pg/ml） | Raw Data | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0.075 | 0.079 | 0.077 | |
| 62.5 |
0.125 |
0.111 | 0.118 | 0.041 |
| 125 | 0.165 | 0.155 | 0.160 | 0.083 |
| 250 | 0.247 | 0.229 | 0.238 | 0.161 |
| 500 | 0.395 | 0.387 | 0.391 | 0.314 |
| 1000 | 0.741 | 0.717 | 0.729 | 0.652 |
| 2000 | 1.434 | 1.346 | 1.390 | 1.313 |
| 4000 | 2.446 | 2.412 | 2.429 | 2.352 |
注意：本圖僅供參考，應(yīng)以同次試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品所繪標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算標(biāo)本中人Dkk-1的含量。
重復(fù)性
板內(nèi)，板間變異系數(shù)均<10%。
| 板內(nèi)重復(fù)性 | 板間重復(fù)性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 樣本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 重復(fù)次數(shù) | 16 | 16 | 16 | 12 | 12 | 12 |
| 平均值（pg/ml） | 3007.5 | 1505.2 | 501.6 | 2998.4 | 1497.5 | 497.8 |
| 標(biāo)準(zhǔn)差 | 246.62 | 121.92 | 39.63 | 242.87 | 121.30 | 41.32 |
| 變異系數(shù)（%） | 8.2 | 8.1 | 7.9 | 8.1 | 8.1 | 8.3 |
科研工具箱
別稱
DKK1, SK
基因ID
Gene ID: 22943
功能
Dkk-1 是 DKK(Dickkopf)蛋白家族的成員，還包括 Dkk-2、Dkk-3 和Dkk-4。Dkk-1 最初被鑒定為非洲爪蛙頭部形成的關(guān)鍵分子，它是一種具有兩個(gè)富含半胱氨酸區(qū)域的分泌蛋白，通過抑制 Wnt 信號(hào)通路參與胚胎發(fā)育。Dkk-1、-2 和-4 通過與 LRP5/6 結(jié)合，阻止 LRP5/6 與Wnt-卷曲受體復(fù)合物的相互作用，發(fā)揮典型 Wnt 信號(hào)拮抗劑的作用。Dkk 蛋白在成人和胚胎組織中有不同的表達(dá)模式，對(duì)組織發(fā)育和形態(tài)發(fā)生有廣泛的影響。DKK-1 表達(dá)不足的小鼠在胚胎形成過程中缺乏頭部形成并死亡。其他表達(dá)位點(diǎn)包括發(fā)育中的神經(jīng)元、毛囊和眼睛的視網(wǎng)膜。Wnt 信號(hào)和 Dkk-1 抑制之間的平衡對(duì)骨形成和穩(wěn)態(tài)至關(guān)重要。骨中 Dkk-1 活性不足或過剩分別導(dǎo)致骨密度增加或降低。在成人中，Dkk-1 在成骨細(xì)胞、骨細(xì)胞和神經(jīng)元中表達(dá)。腦缺血誘導(dǎo) Dkk-1表達(dá)，導(dǎo)致神經(jīng)元細(xì)胞死亡。在多發(fā)性骨髓瘤患者中，骨髓血漿和外周血中 Dkk-1 水平升高，這種 Dkk-1 濃度升高與溶骨性骨病變有關(guān)。
研究領(lǐng)域
免疫學(xué);發(fā)育生物學(xué); 心血管生物學(xué); 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo);
