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產(chǎn)品概述
QuantiCyto® Human EGFR ELISA kit
Human
7.8pg/ml
15.6-1000pg/ml
雙抗體夾心法
比色法
血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、腦脊液、胸腔積液、組織勻漿液等
100 μl/well
3.5h
用于體外定量檢測(cè)血清、血漿或其他適用樣品中天然及部分重組Human EGFR濃度
本試劑盒特異性識(shí)別天然和重組Human EGFR
與以下細(xì)胞因子等無(wú)明顯交叉反應(yīng)：Human EGF,ErbB3,ErbB2,ErbB4;Mouse EGF
欣博盛 QuantiCyto? ELISA試劑盒采用雙抗體夾心法：抗Human EGFR單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品中的Human EGFR會(huì)與單抗結(jié)合，游離的成分被洗去。加入生物素化的抗Human EGFR抗體和辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素，生物素與親和素特異性結(jié)合；抗Human EGFR抗體與結(jié)合在單抗上的Human EGFR結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物，若反應(yīng)孔中有Human EGFR，辣根過(guò)氧化物酶會(huì)使無(wú)色的顯色劑現(xiàn)藍(lán)色，加終止液變黃。在450 nm處測(cè)OD值，Human EGFR濃度與OD450值之間呈正比，可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中Human EGFR的濃度。
本產(chǎn)品僅供科研使用、不用于臨床診斷
產(chǎn)品性能
組分
| 名稱 | 48T | 96T |
|---|---|---|
| 抗體預(yù)包被酶標(biāo)板 | 8×6 | 8×12 |
| 凍干標(biāo)準(zhǔn)品 | 1 ng/支×2 支 | 1 ng/支×3 支 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品&標(biāo)本通用稀釋液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
| 濃縮生物素化抗體 | 1 支（規(guī)格見標(biāo)簽） | 1 支（規(guī)格見標(biāo)簽） |
| 生物素化抗體稀釋液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 濃縮酶結(jié)合物 | 1 支（規(guī)格見標(biāo)簽） | 1 支（規(guī)格見標(biāo)簽） |
| 酶結(jié)合物稀釋液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 濃縮洗滌液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
| 顯色底物（TMB） | 6 ml×1 瓶 | |
| 反應(yīng)終止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 封板膠紙 | 3張 | 6張 |
| 產(chǎn)品說(shuō)明書 | 1份 | 1份 |
運(yùn)輸溫度
冰袋存放說(shuō)明/保質(zhì)期
| 未開封完整試劑盒 | 4℃，請(qǐng)?jiān)诒Ｙ|(zhì)期內(nèi)使用 | |
|---|---|---|
| 已開封試劑盒 | 抗體包被板條 | 未用完的板條放回帶拉鏈鋁箔袋封口 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品 | 負(fù)20℃可儲(chǔ)存 6 個(gè)月左右，稀釋后即用即棄 | |
| 濃縮生物素化抗體 | 4℃可儲(chǔ)存 1 個(gè)月左右，稀釋后即用即棄 | |
| 濃縮酶結(jié)合物（避光） | ||
| 標(biāo)準(zhǔn)品&標(biāo)本通用稀釋液 | 4℃可儲(chǔ)存 1 個(gè)月左右 | |
| 生物素化抗體稀釋液 | ||
| 酶結(jié)合物稀釋液 | ||
| 顯色底物（避光） | ||
| 反應(yīng)終止液 | ||
| 濃縮洗滌液20× |
凍干標(biāo)準(zhǔn)品推薦于-20℃保存；若條件不足，也可保存于4℃。
已開封試劑盒效期特指試劑開蓋后效期，如果僅拿出標(biāo)準(zhǔn)品置于-20℃，其他組分未啟用，效期同未開封完整試劑盒。
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實(shí)驗(yàn)所需自備器材
1. 酶標(biāo)儀(450 nm波長(zhǎng)濾光片)。 2. 進(jìn)口品牌高精度加液器及一次性吸頭：0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒溫箱, 雙蒸水或去離子水，坐標(biāo)紙等。相關(guān)數(shù)據(jù)
標(biāo)準(zhǔn)曲線
| Dose（pg/ml） | Raw Data | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0.087 | 0.083 | 0.085 | |
|
15.6 |
0.161 |
0.155 | 0.158 | 0.073 |
| 31.3 | 0.239 | 0.221 | 0.230 | 0.145 |
| 62.5 |
0.370 |
0.356 | 0.363 | 0.278 |
| 125 | 0.626 | 0.598 | 0.612 | 0.527 |
| 250 | 1.009 | 0.993 | 1.001 | 0.916 |
| 500 | 1.618 | 1.608 | 1.613 | 1.528 |
| 1000 | 2.636 |
2.586 |
2.611 | 2.526 |
注意：本圖僅供參考，應(yīng)以同次試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品所繪標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算標(biāo)本中人EGFR的含量。
重復(fù)性
板內(nèi)，板間變異系數(shù)均<10%。
| 板內(nèi)重復(fù)性 | 板間重復(fù)性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 樣本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 重復(fù)次數(shù) | 24 | 24 | 24 | 16 | 16 | 16 |
| 平均值（pg/ml） | 801.5 | 421.4 | 105.6 | 842.2 | 402.8 | 114.8 |
| 標(biāo)準(zhǔn)差 | 51.30 | 30.34 | 7.18 | 59.80 | 29.40 | 7.92 |
| 變異系數(shù)（%） | 6.4 | 7.2 | 6.8 | 7.1 | 7.3 | 6.9 |
科研工具箱
別稱
ErbB; ErbB1; ERBB1PIG61; HER1; HER-1; mENA
基因ID
Gene ID:1956
功能
表皮生長(zhǎng)因子受體(Epidermal growth factor receptor,EGFR)，也稱為HER-1、ErbB1或ErbB，是一種跨膜糖蛋白，是酪氨酸激酶受體ErbB家族的四個(gè)成員之一。其他的3個(gè)成員分別為ErbB2(Neu、HER-2)、ErbB3(HER-3)和ErbB4(HER-4)。所有家族成員都是具有胞外結(jié)構(gòu)域(ECD)的I型跨膜糖蛋白，該結(jié)構(gòu)域包含兩個(gè)由間隔區(qū)隔開的富含半胱氨酸的區(qū)域。成熟的人EGFR是一種170kDa的蛋白質(zhì)，人EGFRcDNA編碼一個(gè)1210個(gè)氨基酸的前體，一個(gè)24個(gè)氨基酸的信號(hào)肽，一個(gè)621個(gè)氨基酸的胞外區(qū)(ECD)，一個(gè)23個(gè)氨基酸的跨膜區(qū)和一個(gè)542個(gè)氨基酸的胞質(zhì)區(qū)。在ECD中，人EGFR與小鼠和大鼠EGFR有88%的氨基酸序列一致性，與人ErbB2、ErbB3和ErbB4的ECD有43%~44%的氨基酸序列一致性。EGFR結(jié)合EGF家族配體EGF、雙調(diào)蛋白(amphiregulin)、TGF-α、β細(xì)胞素(betacellulin)、表調(diào)蛋白(epiregulin)、HB-EGF和Epigen。這些分子作為跨膜蛋白表達(dá)，但通過(guò)蛋白水解從細(xì)胞表面脫落。配體結(jié)合誘導(dǎo)EGFR同二聚化以及與ErbB2、ErbB3或ErbB4的異二聚化。這導(dǎo)致激酶結(jié)構(gòu)域的激活、酪氨酸自磷酸化和受體-配體復(fù)合物的激活。EGFR信號(hào)調(diào)節(jié)多種生物功能，包括細(xì)胞增殖、分化、運(yùn)動(dòng)和凋亡。EGFR的結(jié)構(gòu)、表達(dá)和信號(hào)傳導(dǎo)的改變與多種癌癥的發(fā)展和轉(zhuǎn)移有關(guān)，尤其是上皮起源的癌癥。EGFR在多種腫瘤中過(guò)度表達(dá)，是幾種QuantiCyto?EHC095HumanEGFR10抗癌藥物的靶點(diǎn)。研究顯示宮頸癌和胃癌患者血清中以及鱗狀細(xì)胞癌患者尿液中可溶性EGFR的水平升高。血清EGFR升高也與晚期結(jié)直腸癌化療的反應(yīng)性相關(guān)，然而在卵巢癌、非小細(xì)胞肺癌和頭頸癌中血清EGFR會(huì)降低。
研究領(lǐng)域
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo);細(xì)胞生物學(xué);癌癥生物學(xué);微生物學(xué);神經(jīng)科學(xué)
