實驗條件
ELISA試劑盒白介素類檢測抗體多用間接型ELISA，以純化抗原包被載體，經(jīng)4℃過夜，以無關(guān)蛋白封閉至少2小時以上，加入待測樣品，室溫孵育1小時，洗滌干凈后加酶標(biāo)抗體，再經(jīng)室溫孵育、洗滌后，以底物顯色，顯色到一定程度終止反應(yīng)，在酶標(biāo)儀上讀結(jié)果或以肉眼判斷。
固相載體：
可作為固相載體的物質(zhì)很多，如：纖維素、聚丙烯酰胺、聚苯乙烯、聚丙烯、交聯(lián)葡聚糖、玻璃、硅橡膠、瓊脂糖凝膠等?？梢愿鞣N形式出現(xiàn)；試管、微量反應(yīng)板凹孔、小珠.....常用的是聚苯乙烯制品，其吸附性好，固相包被的機(jī)制一般不外乎物理吸附和共價交聯(lián)。
類 型：
ELISA具體方法的類型繁多，試劑的標(biāo)準(zhǔn)化問題還未最后解決，溫育的時間、溫度、洗滌液的種類及洗滌次數(shù)等都是影響測定的因素。但參考以上基本過程，ELISA試劑盒無論怎樣變化，均離不開抗原-抗體反應(yīng)、酶標(biāo)抗體的免疫學(xué)反應(yīng)及酶催化作用。
特 點：
1、敏感性高，可檢出濃度在ug~mg/ml水平；
2、特異性強(qiáng)；
3、重復(fù)性好；
4、快速、簡便、廉價。
封閉：
以無關(guān)蛋白占據(jù)載體上未被包被的空隙，常用的封閉液是1%牛血清白蛋白或10%小牛血清。
待測樣品：
稀釋度要合適，濃度太大會發(fā)生非特異性吸附造成假陽性，過分稀釋會影響抗原-抗體之間的免疫學(xué)反應(yīng)。選擇zui適稀釋度，在實驗體系中取光密度在1.0左右的稀釋度為宜。
酶結(jié)合物：
ELISA試劑盒使用高質(zhì)量的酶結(jié)合物是ELISA成功的關(guān)鍵。
溫馨提示：在進(jìn)行ELISA實驗時，先可以把自己以購買的ELISA試劑盒說明書完整的看一遍，再進(jìn)行操作。如在操作的過程中有出錯或遺漏，請聯(lián)系ELISA試劑盒廠商咨詢。
