什么是樣本溶血?
樣本溶血是指在血液樣本的采集、處理、儲存或運(yùn)輸過程中,由于內(nèi)外因素導(dǎo)致紅細(xì)胞破裂,紅細(xì)胞中血紅蛋白逸出,從而使血清或血漿變?yōu)檠t色的現(xiàn)象。
溶血樣本可能對ELISA實(shí)驗(yàn)造成怎樣的影響?
溶血會導(dǎo)致血細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白的釋放,血紅蛋白具有類似過氧化物酶的活性,這可能會在以辣根過氧化物酶(HRP)為標(biāo)記酶的ELISA測定中增加非特異性顯色,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性;溶血樣本中的紅細(xì)胞碎片和其他細(xì)胞成分可能會干擾ELISA檢測中的化學(xué)反應(yīng)和比色分析,導(dǎo)致檢測結(jié)果偏差,使得實(shí)驗(yàn)結(jié)果無法準(zhǔn)確反映樣本中抗原的真實(shí)濃度。
針對實(shí)驗(yàn)中可能遇到的樣本溶血,我們提供如下預(yù)防或處理建議:
1. 規(guī)范采血操作:使用適合取樣的針頭,避免過度抽吸,確保采血過程中的平穩(wěn)操作;
2. 輕柔處理樣本:在樣本的混合和處理過程中,動作要輕柔,避免劇烈震蕩樣本;離心處理時(shí)不宜轉(zhuǎn)速過大或時(shí)間太長;
3. 合適的保存和運(yùn)輸條件:確保樣本在適當(dāng)?shù)臏囟葪l件下保存和運(yùn)輸,避免高溫或低溫環(huán)境,并避免樣本受到劇烈搖晃或沖擊;
4. 使用高質(zhì)量、規(guī)范的采血工具和儲存容器;
5. 及時(shí)分離血清或血漿:在采血后盡快進(jìn)行離心分離,全血需盡快處理成血清/血漿樣本,全血不可凍融,以減少紅細(xì)胞破裂的機(jī)會;
6. 避免反復(fù)凍融:樣本應(yīng)一次性使用,避免反復(fù)凍融,因?yàn)檫@會導(dǎo)致蛋白質(zhì)降解和細(xì)胞破裂。
若樣本溶血輕微(淺紅色),仍可進(jìn)行ELISA檢測,建議適當(dāng)增加洗板次數(shù),減少背景過高影響,實(shí)驗(yàn)后將溶血與非溶血樣本進(jìn)行對照試驗(yàn),判斷是否有影響,并做好相應(yīng)記錄;若溶血嚴(yán)重(深紅色),建議重新取樣。
如果您在ELISA實(shí)驗(yàn)中遇到問題且不知道如何處理,可聯(lián)系欣博盛生物,我們將安排專業(yè)的技術(shù)人員可以為您解疑答惑,助您順利開展實(shí)驗(yàn)。
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