一般ELISA試劑盒操作步驟:
1.
取出試劑盒,平衡至室溫。
未用的板條與干燥劑請(qǐng)放回鋁箔袋內(nèi),密封保存于4℃。
2.
加入標(biāo)準(zhǔn)品與檢測樣本(100μl/孔)
37℃避光孵育90min。
3.
提前20min準(zhǔn)備生物素化抗體工作液。
4.
洗板5次
5.
空白孔加入生物素化抗體稀釋液,其余孔加入生物素化抗體工作液(100μl/孔),37℃避光孵育60min。
6.
提前20min準(zhǔn)備酶結(jié)合物工作液,
避光室溫(22-25℃)放置。
7.
洗板5次
8.
空白孔加酶結(jié)合物稀釋液,其余孔加入酶結(jié)合物工作液(100μl/孔),37℃避光孵育30min。
9.
預(yù)熱酶標(biāo)儀,設(shè)置好檢測程序。
10.
洗板5次
11.
加入顯色底物(TMB) 100μl/孔,37℃避光孵育15min。
12.
加入反應(yīng)終止液100μl/孔,混勻后即刻測量OD450值。保存數(shù)據(jù)。
13.
實(shí)驗(yàn)完畢后,參照說明書保存未用完的試劑至有效期結(jié)束。